2020-09-29 09:54:56admin 4420

陽離子交換柱層析原理是利用樹脂的電荷基團與水中的離子發生反應，從而分離水中的混合物這就是層析。

什么是離子交換柱層析

離子交換柱層析使用離子交換樹脂（一種具有離子交換特性的物質）作為固定相，用于與流動相中的特定離子進行可逆交換，從而分離混合物的層析方法

例如，陽離子交換樹脂對離子的結合力按以下順序。 Li +蛋白質和其他生物聚合物通常是兩性的，它們與陽離子交換樹脂的結合主要與它們的性質和pH有關。以用陽離子交換樹脂分離蛋白質為例，在某些pH條件下，等電點pI pH的蛋白質帶正電，并且可以與陽離子交換樹脂結合。通常pI越高，蛋白質與離子交換樹脂的結合越強。

陽離子交換柱層析原理

層析法的最基本特征是它具有固定相和流動相。當由于混合物成分的物理和化學性質（吸附，溶解度，分子形狀和大小，分子等）使兩相相互移動時，由于電荷和親和力等的不同，使兩相間進行反復多次的分配而得到分離。

離子交換柱層析是基于各種離子或離子化合物的分離和純化，以及離子交換樹脂的結合強度。離子交換柱層析的固定相是一種離子交換樹脂，由一種不溶于水的惰性聚合物基質形成，該基質通過特定的化學反應共價連接至特定的電荷基團。離子交換樹脂可分為三部分：聚合物基質，電荷基團和抗衡離子。

電荷基團與聚合物共鍵形成離子可交換的電荷基團。抗衡離子是與帶電基團結合的抗衡離子，可與溶液中的其他離子基團發生可逆交換反應。抗衡離子帶正電的離子交換樹脂可以交換成帶正電的離子基團，稱為陽離子交換樹脂。帶負電荷離子交換樹脂的抗衡離子交換帶負電荷的離子基團，被稱為陰離子交換樹脂。

陽離子交換柱的使用方法

1.交換

將測試溶液添加到交換柱中，并使用活塞控制交換的特定流速。片刻之后上層樹脂全部被交換、下層未被交換，中間則部分被交換，這一段稱為“交界層”。

2.裝柱

離子交換通常在離子交換柱中進行。離子交換柱通常由玻璃制成，并且在安裝交換柱時，將一層玻璃絲鋪設在交換柱的下端，倒入少量水，并倒入含有水的樹脂。樹脂下沉以形成交換層。安裝離子交換柱時，請確保在樹脂層中沒有氣泡殘留，以便在更換過程中測試溶液不與樹脂接觸。樹脂的高度通常為柱高度的約90％。還應在離子交換柱的頂部放置一層玻璃纖維，以防止添加測試溶液時樹脂被洗掉。安裝更換離子交換柱后，請用蒸餾水清洗并關閉活塞以供使用。由于不能讓樹脂暴露于空氣中，溶液的添加會在樹脂間隙中形成氣穴，導致交換不徹底。

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